熒光光譜儀是一種用于測量物質(zhì)在特定波長激發(fā)光照射下所發(fā)射熒光的強(qiáng)度、波長分布及壽命等特性的精密分析儀器。其基本原理是:當(dāng)物質(zhì)吸收高能光子(通常為紫外或可見光)后,電子躍遷至激發(fā)態(tài),隨后通過非輻射弛豫回到較低激發(fā)態(tài),并以發(fā)射較低能量光子(即熒光)的形式返回基態(tài)。通過檢測熒光信號,可對樣品的成分、結(jié)構(gòu)、濃度及微環(huán)境變化進(jìn)行定性與定量分析。
該儀器具有靈敏度高(可達(dá)ppb甚至ppt級)、選擇性好、非破壞性、樣品用量少等優(yōu)點(diǎn),廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境監(jiān)測、材料科學(xué)、食品檢測及藥物研發(fā)等領(lǐng)域。
熒光光譜儀的組成部分詳解:
一、激發(fā)系統(tǒng)
功能:提供特定波長的光以激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)。
組成部件:
光源
氙燈:常用連續(xù)光源,覆蓋紫外到可見光區(qū)(200-1000 nm),適用于寬范圍激發(fā)。
激光器:單色性好、強(qiáng)度高,適用于特定波長激發(fā)(如405 nm、532 nm)。
LED光源:壽命長、能耗低,適用于便攜式或低成本儀器。
單色器(激發(fā)單色儀)
光柵或棱鏡:將光源發(fā)出的復(fù)合光分離為單色光,通過旋轉(zhuǎn)光柵或棱鏡選擇特定激發(fā)波長。
狹縫:控制進(jìn)入單色器的光束寬度,影響波長分辨率。
濾光片(可選)
進(jìn)一步過濾雜散光,提高激發(fā)光純度,尤其適用于簡單光譜分析。
二、樣品室
功能:容納待測樣品,確保激發(fā)光有效照射樣品并收集熒光。
組成部件:
樣品池(比色皿)
材質(zhì):石英(紫外區(qū))或玻璃(可見光區(qū)),需透明且化學(xué)惰性。
形狀:方形或圓形,適用于液體、固體或粉末樣品。
樣品架
固定樣品池,確保光路對準(zhǔn),部分儀器支持自動(dòng)換樣。
溫控裝置(可選)
精確控制樣品溫度(如±0.1℃),研究溫度對熒光特性的影響。
三、發(fā)射系統(tǒng)
功能:收集樣品發(fā)射的熒光,分離并選擇特定波長進(jìn)行檢測。
組成部件:
收集光學(xué)元件
透鏡或反射鏡:聚焦熒光信號,減少光損失。
光纖(可選):靈活傳輸熒光至檢測器,適用于遠(yuǎn)程或復(fù)雜樣品檢測。
單色器(發(fā)射單色儀)
光柵或棱鏡:將熒光分離為單色光,通過旋轉(zhuǎn)選擇檢測波長。
狹縫:控制檢測波長范圍,影響光譜分辨率。
濾光片(可選)
進(jìn)一步過濾激發(fā)光殘余或雜散光,提高信噪比。
四、檢測系統(tǒng)
功能:將熒光光信號轉(zhuǎn)換為電信號并放大,供后續(xù)分析。
組成部件:
光電探測器
光電倍增管(PMT):高靈敏度、低噪聲,適用于弱熒光檢測,但需高壓供電。
電荷耦合器件(CCD):可同時(shí)檢測多波長熒光,適用于快速光譜掃描。
雪崩光電二極管(APD):中等靈敏度,適用于便攜式儀器。
放大器
放大探測器輸出的微弱電信號,提高信噪比。
模數(shù)轉(zhuǎn)換器(ADC)
將模擬電信號轉(zhuǎn)換為數(shù)字信號,便于計(jì)算機(jī)處理。
五、數(shù)據(jù)處理與控制系統(tǒng)
功能:控制儀器運(yùn)行、采集數(shù)據(jù)并進(jìn)行分析處理。
組成部件:
計(jì)算機(jī)
運(yùn)行專用軟件,控制光源、單色器、探測器等部件協(xié)同工作。
控制軟件
參數(shù)設(shè)置:激發(fā)波長、發(fā)射波長、掃描速度、積分時(shí)間等。
數(shù)據(jù)采集:實(shí)時(shí)記錄熒光強(qiáng)度隨波長或時(shí)間的變化。
光譜處理:基線校正、峰擬合、定量分析(如標(biāo)準(zhǔn)曲線法)。
輸出設(shè)備
顯示器、打印機(jī)或數(shù)據(jù)接口,用于顯示或?qū)С龉庾V圖及分析結(jié)果。
六、輔助系統(tǒng)(可選)
穩(wěn)壓電源
為光源、探測器等提供穩(wěn)定電壓,減少電源波動(dòng)對測量的影響。
制冷裝置
降低探測器溫度(如PMT需-20℃以下),減少熱噪聲,提高靈敏度。
自動(dòng)進(jìn)樣器
實(shí)現(xiàn)多樣品連續(xù)檢測,提高分析效率。
校正模塊
定期用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(如羅丹明B)校準(zhǔn)儀器波長和強(qiáng)度準(zhǔn)確性。